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TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara 6088 200 次 1,983 元
 
■ 制品内容 (200 次量)
UNG (2 U/μl) 100 μl
dU plus dNTP Mixture* (12.5×) 800 μl
MgCl2 (25 mM) 1 ml
 
* dU plus dNTP Mixture的Na盐溶液组成如下: dUTP 7.5 mM;dATP 2.5 mM;dGTP 2.5 mM;dCTP 2.5 mM
 
■ 制品说明
PCR是一种非常敏感的DNA扩增技术,易受污染影响,PCR扩增产物的污染会产生假阳性结果。PCR扩增产物的污染是End-point PCR方法,特别在食品、环境检测中是令人头痛的问题。
本制品是一种可防止假阳性产生的试剂盒。使用本制品是在PCR反应时以dUTP取代dTTP,并同时使用对含有dU的DNA具有降解作用的UNG酶 (Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前加入UNG可降解含有尿嘧啶的PCR产物,而对不含尿嘧啶的模板无任何影响,可选择性水解含有尿嘧啶的PCR产物。 UNG的作用原理:在PCR反应前25℃、10分钟反应中,UNG酶可水解PCR反应液中含有尿嘧啶的PCR产物的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。随后进行95℃、2分钟热处理,在UNG酶失活的同时进一步对磷酸骨架水解,从而消除含有尿嘧啶的PCR产物的污染。UNG酶可以作用于单链或双链DNA,对RNA无活性。
本试剂盒除含有UNG酶外还附带含有dUTP的dNTP Mixture以及MgCl2溶液。使用本试剂盒时请与TaKaRa Taq Hot Start Version (Code No.: R007A/B) 等Pol I 型PCR酶组合使用。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事项
从反应液的配制到PCR产物的检出应分别在4个操作区操作,操作区推荐进行物理性隔离。
操作区1:反应液的配制及分装。
操作区2:样品的制备。
操作区3:将样品添加到反应液中。
操作区4:PCR反应及凝胶电泳对PCR产物进行检出。
为防止污染,除在操作区4外请避免对PCR扩增产物tube进行开闭。
 
 

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