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体 外 转 录

★ 对各物种来源的基因均可进行体外转录
★ 使用Takara特别设计的T7 Promoter序列,转录效率高
体外转录是使用RNA Polymerase,以含有启动子序列的双链DNA为模板,大量合成与启动子下游的单链DNA互补的单链RNA的方法。
体外转录可以用于以下几方面实验:
1. 实时定量RNA标准品。
2. 病毒RNA模板:作为病毒检测阳性对照,或用于进一步研究病毒机理或疫苗特性。
3. 蛋白质合成的模板:用于合成目的蛋白质,研究目的基因表达。
4. 特定RNA分子作为RNA Marker。
5. 探针:用于芯片、Northern、Southern 杂交。
6. RNA干扰(RNAi):制备siRNA。
7. CRISPR/Cas9 基因组编辑:制备gRNA。
 
■ 服务内容
◇ RNA合成模板的制备
可以委托我们通过人工合成基因或基因获取等方式构建质粒、或PCR法制备RNA合成的模板。
◇ RNA合成
将双链DNA (RNase free) 使用RNA polymerase体外转录成RNA,并将体外转录的RNA进行纯化处理和质检。
◇ siRNA制备或gRNA制备
 
■ 服务说明
1. 目前接收的样品形式主要为含有T7 promotor或SP6 promotor的质粒或PCR产物。要求质粒
浓度≥200 ng/μl,总量≥5 μg;PCR产物总量≥2 μg。
2. 若您的模板中不含有T7 promotor或SP6 promotor时,我们可以通过PCR的方法在序列中引入promotor,从而进行RNA的合成,但PCR过程中存在基因突变的可能性,望了解。
3. 请在填写“Takara体外转录服务委托书”时,说明您的下一步实验目的,以便于我们根据您的实验需求选择不同的RNA纯化方法。
4. 请将电子版序列发送到service10@takara.com.cn中,并注明5’ 端及3’ 端。如果您有其它背景资料,也请发给我们,这将会帮助我们更好的理解您的实验背景,有利于实验的顺利进行。
5. 对于非本公司测序的质粒样品,我们首先要进行测序验证,并收取相应的测序费用。请您提供给我们目的序列及测序引物信息。
 
■ 价格·实验周期
服务项目 收费标准 实验周期
            RNA合成模板的制备 询价 视具体情况而定
            RNA合成 询价 5~15个工作日
            RNA标准品制备 询价 视具体情况而定
            siRNA制备          
询价 视具体情况而定
            gRNA制备          
询价 视具体情况而定
注: 需要进行人工合成基因、质粒构建等服务时请参照相关部分,如果目录中没有登载,请垂询。
 
■ 提供结果
电子版实验报告、体外转录后的RNA或相关制品。
 
如果您需要进行此项服务,请填写“Takara体外转录服务委托书”(请与本公司联系索取)。填写后通过传真或E-mail发送给我们或当地代理商。