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产品选择指南

技术服务信息

机构用户解决方案

cDNA文库构建

★ 使用载体广泛:构建cDNA文库时,除常用质粒和λ噬菌体载体之外,还可以使用客户要求的任意载体。
★ 起始RNA量低:运用SMART技术,能够从微量Total RNA样品起始制作cDNA文库。
★ 服务项目多元化:不仅可以构建普通的cDNA文库,还可以构建均一化cDNA文库、酵母单杂文库、酵母双杂文库、三读码框文库,并且可以提供酵母单双杂筛选等相关的后续服务。 (在酵母杂交实验中,三框文库能够使发现互作蛋白的机会和种类都大大增加)
 
■ 概要
本公司提供基于链置换法SMART法的cDNA文库 (cDNA Library) 构建服务。使用的载体为质粒或λ噬菌体。在连接、克隆cDNA片段时,进行cDNA片段的长度筛选,基本上去除了400 bp以下的cDNA短片段,保证较长cDNA片段的克隆效率。
 
■ 质量标准
初级文库库容≥1.0×106;重组效率≥90%;普通样品平均插入片段长度≥1.0 kb
对于均一化文库,我们会对其初级文库随机挑选96 个克隆测序分析,序列的冗余率保证低于10%。
 
■ 提供结果
按客户委托要求提供完整的实验报告书 (包括实验相关序列信息及实验各阶段的检测电泳图谱) 及相关样品。
 
■ 操作程序
1. 请您下载<Takara cDNA文库构建服务委托书>,详细填写后发送给当地代理商或宝生物公司。
2. 我们在收到委托单后,会根据您的要求,尽快制作一份报价单,并发送给当地的代理商。
3. 确认报价后,您可以通过代理商寄送原料样品。
4. 我们在收到样品后,会尽快进行RNA的提取及质量检测,并开始文库构建工作。
5. 实验完成后,为您提供完整的实验报告及实验结果样品。您可以通过代理商,获得实验报告及相关样品。
 
■ 价格·实验周期
服务项目 载体 服务说明 价格 (元) 实验周期
Total RNA提取 - - 500 元/样品 1 周
SMART质粒cDNA文库构建 pUC19 初级文库 15,000 6-8 周
SMART 噬菌体cDNA文库构建 λTriplEx II 初级文库 16,000 6-8 周
Clontech系统酵母单/双杂用cDNA文库构建 pGADT7 初级文库 19,000 6-8 周
均一化文库构建 pGADT7/pUC19 初级文库 询价 6-8 周
三读码框文库构建 pGADT7 初级文库 询价 6-8 周
质粒改造 (在多克隆位点引入特定序列) - - 2,000 2-4 周
质粒开始酶切制作线性载体 - - 2,000 2 周
质粒cDNA文库100万克隆扩增放大 - - 4,000 1 周
三框cDNA文库150万克隆扩增放大
(三种读码框各50万)
- - 5,000 1 周
噬菌体cDNA文库100万克隆扩增放大 - - 5,000 2 周
扩增文库mg级质粒提取 - - 2,000 1 周
pGADT7载体Y187酵母文库制作 - - 8,000 1-2 周
Clontech系统酵母单杂/双杂bait菌株构建 - - 10,000 元/bait 6-8 周
酵母双杂用bait菌株中外源蛋白表达检测* - - 询价 3 周
Clontech系统酵母单杂筛选(至得到筛选菌落) - - 10,000 元/次 2-4 周
Clontech系统酵母双杂筛选(至四缺培养物) - - 15,000 元/次 6-8 周
*:双杂bait菌株中外源蛋白的表达验证实验,可以确认外源蛋白在菌株中是否已经正常表达!这对后续筛选实验的进行及筛选结果的分析判断意义重大,建议后续进行酵母双杂筛选实验的客户选择此项服务。
 
■ 样品提供
1. 请您提供新鲜的、或新鲜经液氮速冻处理的组织;如果是培养细胞,请提供新鲜培养的细胞或经提取试剂裂解的溶液。
2. 您也可以直接提供给我们Total RNA,但要保证RNA没有降解,我们会通过电泳和吸光光度测定等方法进行检测。
 
■ 其他事项
1. 关于较复杂实验的具体内容及要求,请在委托单的基础上,与我们电话沟通。
2. 实验过程中,我们会随时与您沟通所发生的问题,以便双方共同协商解决。
3. 我们可以对构建好的文库提供后续附加服务,如单双杂筛选、单克隆质粒提取、大量测序等,实验费用需另计,请垂询。
 
如果您需要进行此项服务,请填写“Takara cDNA文库构建服务委托书”(请与本公司联系索取)。填写后通过传真或E-mail发送给我们或当地代理商。
 
电话:0411-87643922          传真:0411-87619946         
E-mail:library@takara.com.cn
本公司对Sample的情况及结果保证严守秘密