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TaKaRa Ex Taq(R) R-PCR Version 2.1 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
DRR031A | 250 U | 600 元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
DRR031B (A×5) | 1,250 U | 2,700 元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2,500 U | 5,100 元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TaKaRa Real Time PCR Core Kit | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
D305 | 100 次 | 800 元 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
制品说明 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Real Time PCR法因他的快速性和定量性受到广大科研人员的青睐。本制品是TaKaRa公司针对Real Time PCR开发的定量PCR用相关产品。制品中的DNA聚合酶是将TaKaRa Ex Taq(R)与抗Taq抗体相结合,采用Hot Start法原理研制的,可以有效抑制非特异性PCR扩增, 并且在制品中使用了TaKaRa独自开发研制的专用PCR反应Buffer,大大地增加了定量PCR检测的灵敏度,是一种理想的Real Time PCR用制品。本制品可用于各种Real Time PCR法, 如:TaqMan探针法,嵌合荧光(如SYBR GreenI)法等。本制品扩增的PCR产物3' 端附有一个 "A" 碱基,可直接克隆于T-Vector中。 TaKaRa Real Time PCR Core Kit中配备了Control反应用的模板、引物及探针,可用于Control反应,使用方便。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
活性定义 用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
酶贮存溶液 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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dNTP Mixture | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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纯度 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
10 U的本酶和0.6 mg的lDNA-Hind III在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。 10 U的本酶和0.6 mg的Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。 10 U的本酶和0.6 mg的lDNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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PCR反应性能 1)以lDNA为模板,Real Time PCR反应可很好地扩增300 bp的DNA片段。 2)55℃条件下反应10分钟,抗体对Ex Taq的活性抑制效率达90%以上。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
用途 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Real Time PCR反应。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
使用Smart Cycler(R) II System(TaKaRa Code: SC200)进行Real Time PCR反应。 将TaKaRa Real Time PCR Core Kit中的Positive Control Template梯度稀释为:5×105、5×104、5×103、5×102、5×101 copies/ml,以此为模板进行Real Time PCR反应,制作标准曲线。引物和探针使用了本试剂盒中的Positive Control Primer Mix和Positive Control Probe。操作方法如下: | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Application | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
实验例 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
1. 按下列组份配制PCR反应液。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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2. PCR反应条件如下: | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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3. 结果: | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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图1 荧光信号值(Y轴)与循环圈数(X轴)的扩增 曲线图 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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图2 起始模板量对数值(Y轴)与Ct值(X轴)的 标准曲线图 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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