TaKaRa Ex Taq(R) R-PCR Version 2.1

DRR031A

250 U

600

DRR031B (A×5)

1,250 U

2,700

2,500 U

5,100

TaKaRa Real Time PCR Core Kit

D305

100

800

制品说明

Real Time PCR法因他的快速性和定量性受到广大科研人员的青睐。本制品是TaKaRa公司针对Real Time PCR开发的定量PCR用相关产品。制品中的DNA聚合酶是将TaKaRa Ex Taq(R)与抗Taq抗体相结合,采用Hot Start法原理研制的,可以有效抑制非特异性PCR扩增, 并且在制品中使用了TaKaRa独自开发研制的专用PCR反应Buffer,大大地增加了定量PCR检测的灵敏度,是一种理想的Real Time PCR用制品。本制品可用于各种Real Time PCR法, 如:TaqMan探针法,嵌合荧光(如SYBR GreenI)法等。本制品扩增的PCR产物3' 端附有一个 "A" 碱基,可直接克隆于T-Vector中。

TaKaRa Real Time PCR Core Kit中配备了Control反应用的模板、引物及探针,可用于Control反应,使用方便。

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

酶贮存溶液

dNTP Mixture

纯度

10 U的本酶和0.6 mglDNA-Hind III74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

10 U的本酶和0.6 mgSupercoiled pBR322 DNA74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

10 U的本酶和0.6 mglDNA74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

PCR反应性能

1)以lDNA为模板,Real Time PCR反应可很好地扩增300 bpDNA片段。

255℃条件下反应10分钟,抗体对Ex Taq的活性抑制效率达90%以上。

用途

Real Time PCR反应。

使用Smart Cycler(R) II SystemTaKaRa Code: SC200)进行Real Time PCR反应。

TaKaRa Real Time PCR Core Kit中的Positive Control Template梯度稀释为:5×1055×1045×1035×1025×101 copies/ml,以此为模板进行Real Time PCR反应,制作标准曲线。引物和探针使用了本试剂盒中的Positive Control Primer MixPositive Control Probe。操作方法如下:

Application

实验例

1. 按下列组份配制PCR反应液。

2. PCR反应条件如下:

3. 结果:

1 荧光信号值(Y轴)与循环圈数(X轴)的扩增

曲线图

2 起始模板量对数值(Y轴)与Ct值(X轴)的

标准曲线图