蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法

30% (W/V) Acrylamide

组份浓度

配制量

配制方法

30%（W/V）Acrylamide

1 L

1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45 mm滤膜滤去杂质。

4. 于棕色瓶中4℃保存。

注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴

手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。

40% (W/V) Acrylamide

组份浓度

配制量

配制方法

40%（W/V）Acrylamide

1 L

1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45 mm滤膜滤去杂质。

4. 于棕色瓶中4℃保存。

注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴

手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。

10% (W/V) 过硫酸铵

组份浓度

配制量

配制方法

5×Tris-Glycine Buffer

(SDS-PAGE电泳缓冲液)

组份浓度

配制量

配制方法

0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%（W/V）SDS

1 L

1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，搅拌溶解。

3. 加去离子水将溶液定容至1 L后，室温保存。

5×SDS-PAGE

Loading Buffer

5 ml

1. 量取下列试剂，置于10 ml塑料离心管中。

2. 加去离子水溶解后定容至5 ml。

3. 小份（500 ml/份）分装后，于室温保存。

4. 使用前将25 ml的2-ME加到每小份中。

5. 加入2-ME的Loading Buffer可在室温下保存一个月左右。

组份浓度

配制量

配制方法

0.1%（W/V）考马斯亮蓝R-250, 25%（V/V） 异丙醇, 10%（V/V） 冰醋酸

1 L

1. 称取1 g考马斯亮蓝R-250，置于1 L烧杯中。

2. 量取250 ml的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。

3. 加入100 ml的冰醋酸，搅拌均匀。

4. 加入650 ml的去离子水，搅拌均匀。

5. 用滤纸除去颗粒物质后，室温保存。

组份浓度

配制量

配制方法

10%（V/V）醋酸, 5%（V/V）乙醇

1 L

1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。

2. 充分混合后使用。

组份浓度

配制量

配制方法

组份浓度

配制量

配制方法

组份浓度

配制量

配制方法

0.4%（W/V）AgNO3, 1%（V/V）浓NH3·H2O, 0.04%（W/V）NaOH

100 ml

1. 量取下列试剂，加入100～200 ml的试剂瓶中。

2. 均匀混合。该溶液应为无色透明状。如氨水浓度过低时溶液会呈混浊状，此时应补加浓氨水,

直至透明。

3. 本染色液应现用现配，不宜保存。

组份浓度

配制量

配制方法

0.005%（W/V）柠檬酸, 0.02%（V/V）甲醛

1 L

1. 称量下列试剂，置于1 L试剂瓶中。

2. 加入1 L去离子水后，摇动混合溶解。

3. 室温保存。