s5.FH11

Ampicillin

(100 mg/ml)

组份浓度

配制量

配制方法

100 mg/ml Ampicillin

50 ml

1. 称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。

2. 加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。

3. 用0.22 mm过滤膜过滤除菌。

4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。

IPTG

(24 mg/ml)

组份浓度

配制量

配制方法

24 mg/ml IPTG

50 ml

1. 称量1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。

2. 加入40 ml灭菌水，充分混合溶解后，定容至50 ml。

3. 用0.22 mm过滤膜过滤除菌。

4. 小份分装（1 ml/份）后，-20℃保存。

X-Gal

(20 mg/ml)

组份浓度

配制量

配制方法

组份浓度

配制量

配制方法

组份浓度

配制量

配制方法

1 L

1. 称取下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 滴加5 N NaOH（约0.2 ml)，调节pH值至7.0。

4. 加去离子水将培养基定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，冷却至室温。

6. 加入1 ml Ampicillin（100 mg/ml）后均匀混合。

7. 4℃保存。

组份浓度

配制量

配制方法

1 L

1. 配制磷酸盐缓冲液（0.17 M KH2PO4，0.72 M K2HPO4）100 ml。

溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至 100 ml，高温高压灭菌。

2. 称取下列试剂，置于1 L烧杯中。

3. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

4. 加去离子水将培养基定容至1 L后，高温高压灭菌。

5. 待溶液冷却至60℃以下时，加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。

6. 4℃保存。

组份浓度

配制量

配制方法

组份浓度

配制量

配制方法

1 L

1. 配制250 mM KCl溶液。

在90 ml的去离子水中溶解1.86 g KCl后，定容至100 ml。

2. 配制2 M MgCl2溶液。

在90 ml去离子水中溶解19 g MgCl2后，定容至100 ml，高温高压灭菌。

3. 称取下列试剂，置于1 L烧杯中。

4. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

5. 量取10 ml 250 mM KCl溶液，加入到烧杯中。

6. 滴加5 N NaOH溶液（约0.2 ml)，调节pH值至7.0。

7. 加入去离子水将培养基定容至1 L。

8. 高温高压灭菌后，4℃保存。

9. 使用前加入5 ml灭菌的2 M MgCl2溶液。

组份浓度

配制量

配制方法

100 ml

1. 配制1 M葡萄糖溶液。

将18 g葡萄糖溶于90 ml去离子水中，充分溶解后定容至100 ml，用0.22 mm滤膜过滤除菌。

2. 向100 ml SOB培养基中加入除菌的1 M葡萄糖溶液2 ml，均匀混合。

3. 4℃保存。

组份浓度

配制量

配制方法

组份浓度

配制量

配制方法

组份浓度

配制量

配制方法

1 L

1. 称取下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 滴加5 N NaOH（约0.2 ml)，调节pH值至7.0。

4. 加去离子水将培养基定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，4℃保存。

组份浓度

配制方法

NZYM培养基除不含Casamino Acid（酪蛋白氨基酸）外，其他成份与NZCYM培养基相同。

组份浓度

配制方法

NZM培养基除不含Yeast Extract（酵母提取物）外，其他成份与NZYM培养基相同。

配制方法

1. 按照液体培养基配方准备好液体培养基，在高温高压灭菌前，加入下列试剂中的一种。

2. 高温高压灭菌后，戴上手套取出培养基，摇动容器使琼脂或琼脂糖充分混匀（此时培养基温

度很高，小心烫伤)。

3. 待培养基冷却至50～60℃时，加入热不稳定物质（如抗生素等)，摇动容器充分混匀。

组份浓度

配制量

配制方法

1 L

1. 称取下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 滴加5 N NaOH（约0.2 ml)，调节pH值至7.0。

4. 加去离子水将培养基定容至1 L后，加入15 g Agar。

5. 高温高压灭菌后，冷却至60℃左右。

6. 加入1 ml Ampicillin（100 mg/ml)、1 ml IPTG（24 mg/ml)、2 ml X-Gal（20 mg/ml）后均

匀混合。

组份浓度

配制量

配制方法

1 L

1. 配制磷酸盐缓冲液（0.17 M KH2PO4，0.72 M K2HPO4）100 ml。

溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至 100 ml，高温高压灭菌。

2. 称取下列试剂，置于1 L烧杯中。

3. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

4. 加去离子水将培养基定容至1 L后，加入15 g Agar。

5. 高温高压灭菌后，冷却至60℃左右。

6. 加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液、1 ml Ampicillin（100 mg/ml)、

1 ml IPTG（24 mg/ml)、2 ml X-Gal（20 mg/ml）后均匀混合。