核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法

20×SSC

组份浓度

配制量

配制方法

3.0 M NaCl, 0.3 M 柠檬酸钠

1 L

1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L。

4. 高温高压灭菌后，室温保存。

20×SSPE Buffer

组份浓度

配制量

配制方法

3.0 M NaCl, 0.2 M NaH2PO4, 0.02 M EDTA

1 L

1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。

2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 加NaOH调节pH值至7.4（约6.5 ml的10 N NaOH)。

4. 加去离子水将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

50×Denhardt's溶液

组份浓度

配制量

配制方法

500 ml

1. 称量下列试剂，置于500 ml烧杯中。

2. 加去离子水约400 ml，充分搅拌溶解

3. 加去离子水将溶液定容至500 ml。

4. 用0.45 mm滤膜过滤后，分装成每份25 ml。

5. -20℃保存。

组份浓度

配制量

配制方法

0.5 M Na2HPO4

1 L

1. 称量134 g Na2HPO4·7H2O置于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水充分搅拌溶解。

3. 加入85%的H3PO4（浓磷酸）调节溶液pH值至7.2。

4. 加去离子水定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

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