DNA聚合酶 I (Klenow大片段)

Klenow Fragment

(Large Fragment E. coli DNA Polymerase I)

D2140

150 U

120 元

起源

Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Klenow Fragment

概述

本酶具有5'→3'的DNA聚合酶活性，对于单链DNA具有从3'→5'的外切核酸酶活性，但这种活性较弱，不适用于3'突出末端的平滑化。本酶不含DNA聚合酶 I 所具有的5'→3'的外切核酸酶活性。

1.

5'→3' DNA Polymerase活性

在模板和引物 (DNA或RNA) 存在的条件下，以dNTP作底物，沿5'→3'方向合成与模板互补的DNA。

2. 单链特异性的3'→5'外切核酸酶活性

Klenow的3'→5' Exonuclease活性较弱 (T4 Polymerase的100 ~ 1000分之一)，不适用于

3'突出末端的平滑化。

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活性定义

以合成的Poly d (A-T) DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10 nmol 的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

纯度

10 U的本酶和1 mg的Closed circular (RF I) pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

用途

双脱氧法DNA序列测定 (Sanger法)。

双链DNA末端的平滑化。

寡核苷酸定向诱变 (Oligonucleotide directed mutagenesis) 中双链DNA的合成。

使用随机引物进行DNA标记。

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