大肠杆菌DNA聚合酶 I

DNA Polymerase I

(E. coli)

D2130

250 U

120 元

起源

Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Pol I

概述

DNA Polymerase I (E. coli) 是由带有编码E. coli DNA Polymerase I 基因的大肠杆菌精制而成的，本酶具有以下活性：

1.

5'→3'的DNA聚合酶活性。在模板和引物 (DNA或RNA) 存在的条件下，以dNTP作底物，

沿5'→3'方向合成与模板互补的DNA。

Polymerase活性的反应有以下三种:

● Gap filling

：在双链DNA上的缺口部分的3'-OH上附加核苷酸，补平其单链部

分。

：在双链DNA上的切口部分的3'-OH末端附加核苷酸，同时外切性

除去5'末端的核苷酸。

：通过在切口的3'-OH末端附加核苷酸达到置换具有5'末端的链。

● Nick translation

● Strand displacement

2. 双链特异性的5'→3'外切核酸酶活性

除去受损伤的核苷酸。

分解DNA/RNA杂交体中的RNA。

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3. 单链特异性的3'→5'外切核酸酶活性。

与复制时的正确性有关。存在于和2.不同的活性区域。

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活性定义

以合成的Poly d(A-T) DNA为模板／引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10 nmol 的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

纯度

10 U的本酶和1 mg的Closed circular (RF I) pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

用途

与DNase I (TaKaRa Code: D2210) 一起使用，进行切口平移 (Nick translation)。

通过Okayama-Berg法合成cDNA的第二条链。

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