T4 DNA聚合酶

T4 DNA Polymerase

D2040

50 U

120 元

起源

Escherichia coli carrying the plasmid containing phage T4 DNA polymerase gene

概述

在模板及引物存在的条件下，催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3'-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3'→5'外切核酸酶活性，该活性比Klenow Fragment强100 ~ 1,000倍，也作用于双链DNA，在dNTP存在的条件下表现出聚合酶活性, 当dNTP用尽时转为降解DNA的活性。本酶不含5'→3'的外切核酸酶活性。

活性定义

以热变性小牛胸腺DNA为模板/引物，在37℃、pH8.8的条件下，30分钟内使10 nmol全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

纯度

2 U的本酶和1 mg的Closed circular (RF I) pBR322 DNA在37℃下反应24小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

用途

利用较强的3'→5'的外切核酸酶活性，通过置换合成 (Replacement synthesis) 从DNA片段的3'末端进行标记。

DNA末端的平滑化。

通过引物伸长法解析mRNA转录的起始点。