DR010S

125 U

450

DR010A

250 U

750

DR010B (A×4)

1,000 U

2,800

制品说明

PrimeSTAR HS DNA Polymerase是兼具高保真性和高扩增效率的PCRDNA聚合酶。因其具有极强的3' 5' exonuclease活性而显示出超群的校正功能,是迄今为止保真性能最高的DNA聚合酶;同时还具有优于Taq DNA 聚合酶的高扩增效率。制品中添加了在常温状态下能够抑制DNA Polymerase活性及3' 5' exonuclease活性的抗体, 能够有效防止PCR反应前的引物错配和引物降解。本制品与TaKaRa独自开发的反应Buffer结合使用,可以实现对广泛靶基因的高保真性、高灵敏度、高特异性、高成功率的扩增,在保真性能要求高的PCR扩增反应(如:cDNA克隆等)中能够发挥强大威力。使用本制品扩增得到的PCR产物几乎都为平滑末端(磷酸化后),可克隆于平滑末端载体中。

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

纯度

10 U的本酶和0.6 mglDNA-Hind III74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

10 U的本酶和0.6 mgSupercoiled pBR322 DNA74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。

用途

PCR法扩增DNA

PCR反应性能

lDNA为模板,可以很好地扩增8101215 kbpDNA片段。

以人基因组DNA为模板,可很好地扩增0.512468 kbpDNA片段。

Limited Use Label License: [M54], [L15], [P1]

特长

迄今为止保真性能最高的DNA聚合酶。

超群的PCR扩增效率,对GC rich模板也能进行高效率、高保真扩增。

使用的PCR反应条件具有广谱性,即同一PCR反应条件适用的PCR扩增长度范围广, 可提高实验成功率,对从cDNA或基因组文库中进行复数克隆的PCR扩增最为适合。

本制品为添加单克隆抗体的Hot StartDNA聚合酶,可以实现高特异性PCR扩增。同时, 本制品还具有高退火效率,不仅可以节省反应时间,还可以提高反应特异性。

本实验选取了Tth genomic DNA 8个区域(各约500 bp, GC70%),使用几种不同的高保真DNA聚合酶进行PCR扩增后,将各自PCR产物克隆,并对每种序列挑取复数的克隆进行测序,确认了25万个碱基中的错配碱基数,由此对几种高保真DNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的保真性能进行了比较,图1显示了比较结果。

1 几种高保真DNA聚合酶的保真性能比较

使用PrimeSTAR HS DNA PolymerasePCR扩增产物 (25万碱基) 的测序结果表明,仅12个碱基发生了错配。

l DNA为模板进行8101215 kbpDNA片段扩增反应

Application

1. 按下列组份配制PCR反应液。

实验例

2. PCR反应条件:

3. 结果

以人基因组DNA为模板进行0.512468 kbpDNA片段扩增反应

1. 按下列组份配制PCR反应液。

2. PCR反应条件:

3. 结果

注意事项

PCR反应液的配制可以室温进行,但DNA聚合酶等各试剂配制前请于冰上放置。