DRR021

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900 元

制品说明

本试剂盒含有从血液中提取DNA至进行PCR反应的全套试剂，可在短时间内从极少量的全血（3～10 ml）中提取DNA后进行PCR反应。实验操作时首先将全血加入到Gene trap Solution（WB）中，此时Gene trap Solution（WB）在破坏血细胞的同时，与核酸形成电中性的复合体，通过离心分离回收复合体（沉淀物)，溶解沉淀（DNA）后，可以直接进行PCR反应，扩增目的DNA片段。使用本试剂盒，25～30个PCR循环便可检测出基因组中的单拷贝基因。

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Limited Use Label License: [M57], [P1]

-20℃（Washing solution融化后于4℃保存。)

Protocol

图1 实验操作流程图

实验操作程序

Application

使用健康人的柠檬酸处理血10 ml，按照标准操作程序，扩增Human p53基因的1.7 kbp和2.7 kbp的DNA片段。PCR扩增后，取10 ml进行2%的琼脂糖凝胶电泳，电泳结果如图2。

扩增Human p53基因

图2

Human p53基因的PCR扩增结果

Note

本制品以提取DNA后直接进行PCR反应为目的，如果要从大量全血中提取DNA，建议使用Genome DNA Extraction Kit（TaKaRa Code: D9081)。

血液用量为3～10 ml，血液量少时需增加PCR反应的循环数。

血液样品请使用采血后还未凝固或经抗凝剂处理的全血。抗凝剂一般使用柠檬酸钠、EDTA-2Na、肝素钠，但肝素和高浓度的EDTA往往会阻碍细胞的破碎，肝素还会阻碍PCR反应，扩增2 kbp以上的DNA片段时效率稍低，请斟酌使用。此外，经过各种抗凝剂处理的血液，如果不马上使用，请于-80℃保存。

2×PCR Solution中含有TaKaRa Ex Taq，应避免激烈搅拌及反复冻融。

Gene trap Solution（WB）对眼睛、呼吸器官及皮肤有伤害作用，一旦溅入眼中或触到皮肤上，请立即用大量的水冲洗。为防止危险的发生及样品污染，操作时请戴上乳胶手套和防护镜。

为防止样品间的交叉污染，分取试剂时请务必使用新的灭菌枪头。

使用注意