GC Buffer

2×GC Buffer I

DRR20GC I

1.25 ml

65 元

1.25 ml

DRR20GC II

65 元

2×GC Buffer II

注) *GC Buffer Set中含有2×GC Buffer I和2×GC Buffer II。

GC Buffer Set*

DRR20GC

110 元

各1.25 ml

制品说明

本制品是应用LA PCR原理研制的具有3'→5' Exonuclease活性（Proof reading活性）的耐热性DNA聚合酶。无论是扩增短链DNA还是长链DNA，其效率都优于其它同类产品，尤其在扩增大于10 kbp的DNA片段方面，其优势更加明显，而且保真性能强。当扩增具有复杂二级结构 (GC rich等) 的模板或具有重复序列的模板时，使用GC Buffer进行PCR扩增将非常有效。GC Buffer可以单独购买。使用本制品扩增得到的PCR产物3'端附有一个"A"碱基， 因此可直接克隆于T-Vector中。

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃、30分钟内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位 (U)。

纯度

10 U的本酶和0.6 mg的l DNA-Hind III在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

10 U的本酶和0.6 mg的Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

10 U的本酶和0.6 mg的l DNA在74℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

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PCR性能

以l DNA为模板, 可很好地扩增35 kbp的DNA片段。(10×LA PCR Buffer II, 2×GC

Buffer I)

以Human genome DNA为模板，可很好地扩增17.5 kbp (b-Globin gene) 的DNA片段。

(10×LA PCR Buffer II, 2×GC Buffer I)

以Human genome DNA为模板，可很好地扩增c-jun proto oncogene 1,255 bp (GC含

量65%) 的DNA片段。(2×GC Buffer I, II)

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dNTP Mixture

Limited Use Label License: [M57], [P1]

* dATP、dCTP、dGTP、dTTP的等摩尔的混合物，不用稀释可直接用于PCR反应。

用途

PCR法扩增DNA。

Application 1

扩增l DNA

TaKaRa LA Taq与LA PCR

Buffer II组合，扩增l DNA

1. 以l DNA为模板，选择适当的引物，扩增0.5 kbp ~ 35 kbp的DNA片段。

2. 按使用TaKaRa Code: DRR02AM时 (Protocol) 配制PCR反应液。

3. 按图1所示的条件进行PCR扩增，结果见图1，可以很好地扩增~35 kbp的DNA片段。

图1 用TaKaRa LA Taq 扩增l DNA时的电泳图

Application 2

1.

(2.

(3.

以Huntington's disease基因（舞蹈病HD基因IT15CAG重复）为模板，扩增262 bp (GC

含量73%) 及358 bp (GC含量71.5%) 的DNA片段。

PCR反应Buffer分别使用了LA PCR Buffer II、2×GC Buffer I、2×GC Buffer II 以及B

公司制的GC Kit Buffer。

扩增条件见图2。根据图2所示，使用LA PCR Buffer II 和B公司制的GC Kit Buffer时都没

有目的产物扩增，而使用TaKaRa的两种GC Buffer时目的产物扩增良好。

扩增Huntington's disease

gene

(高GC含量DNA模板)

图2 用GC Buffer扩增高GC含量DNA时的结果