DCY501

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800 元

制品说明

CycleavePCRTM Core Kit是采用Cycling探针法进行Real Time PCR反应的专用试剂盒。该方法不仅秉承了Real Time PCR法的快速性、定量性等特点，而且还具有检出特异性高的优势。使用该方法能够简单、准确地对目的基因进行定性、定量分析及进行SNP分型解析等。

本制品适合于Thermal Cycler DiceTM Real Time System/Smart Cycler(R) II System/ABI PRISM System7000/7700/7900HT，7300/7500 Real-Time PCR System，7500 Fast Real-Time PCR System（Applied Biosystems）等各种机种的Real Time PCR扩增仪。

* Cycling探针法由ID Biomedical授权TaKaRa公司制造。

适用的Real Time PCR扩增仪

Thermal Cycler DiceTM Real Time System (TaKaRa)

ABI PRISM7000/7700/7900HT，7300/7500 Real-Time PCR System，7500 Fast Real-Time PCR System (Applied Biosystems）

LightCycler(R)（Roche Diagnostics）

Line-Gene（Bioer，杭州博日）

Smart Cycler(R) System（Cepheid）

Mx3000P (Stratagene)

其他各种Real Time PCR扩增仪

Limited Use Label License: [M40], [M45], [M46], [M57]

[L4], [L8], [L15], [P1]

试剂盒原理

CycleavePCRTM Core Kit使用TaKaRa Ex Taq HS进行扩增反应，采用Cycling探针法对扩增产物进行实时监测。

1. PCR反应。

PCR法是从微量DNA起始进行目的片段扩增的技术。将变性、退火、延伸作为一个循环，循环反复，在短时间内能够扩增近100万倍的目的基因片段。

本制品使用了Hot Start PCR用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS，能够防止非特异性片段产生及引物二聚体形成，检测灵敏度高。

2. Cycling探针法。

Cycling探针法是由RNA和DNA构成的杂合探针与RNase H组合使用的高灵敏度检出法，

能够高效率地检出扩增过程中及扩增结束时的目的基因片段，具体原理如图1所示：

Cycling探针内部含有RNA碱基、5' 端标记荧光物质、3' 端标记淬灭物质，当探针处于完整状态时，由于荧光淬灭作用抑制荧光物质发出荧光。当探针与扩增产物中互补序列杂交后，RNase H在RNA碱基处切断探针，淬灭抑制作用解除，荧光物质发出荧光。

此时通过测定荧光强度，能够实时监控扩增产物量。如果探针的RNA部分或与RNA部分相邻的2 ~ 3个碱基与模板不匹配，RNase H将不能切断探针，所以该检出方法是一种即使有一个碱基不同也能识别的高特异性检出方法。

图1 Cycling探针法原理图

试剂盒特长

● 由Real Time PCR和Cycling探针法相结合，可以迅速准确地获得检测结果。该检出方法

是一种即使有一个碱基不同也能识别的高特异性检出方法。

● DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS，可以进行Hot Start法PCR反应，具有扩增效率

高、扩增灵敏度好、扩增特异性强的特点。

Application

操作方法

使用Positive Control进行CycleavePCR反应（使用Smart Cycler II)。

1. 按下列组份配制PCR反应液。

实验例

2. 反应条件设定。

4. Real Time PCR反应结果。