EASY Dilution (for Real Time PCR)

D9160

1 ml×8 支

600 元

制品说明

本制品是制作标准曲线时用于梯度稀释DNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或模板RNA如果用水或TE稀释时，由于对Microtube的吸附作用等原因的影响，往往不能准确地进行稀释，导致实验结果精度降低。使用本制品稀释DNA或RNA样品时，即使稀释至低浓度也能够准确稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。

使用方法

本制品为1×浓度，稀释后的模板DNA或模板RNA可直接使用。梯度稀释后的标准品溶液，

可根据具体实验情况进行添加。

使用注意

为避免样品间的交叉污染，最好适量分装小份保存。

梯度稀释cDNA，制作标准曲线。

Target : Mouse Ribosomal Protein S18

Template : Mouse Liver Total RNA (500 ng/ul) 反转录得到的一部分cDNA溶液(50 ng/ml)，

使用本制品按10倍浓度梯度稀释为5 ng/ml、500 pg/ml、50 pg/ml、5 pg/ml、

0.5 pg/ml。分别取2 ml，对1 pg~100 ng的cDNA制作标准曲线（Negative Control使用2 ml本制品)。

扩增长度： 128 bp

实验仪器： Smart Cycler II System

检测方法： SYBR Green I 嵌合荧光法

Application

实验例

1．Real Time PCR反应结果。

Real Time PCR扩增曲线图及融解曲线图如下：

反应结束后，根据各扩增曲线的Ct值，制作标准曲线。

2．结果分析。

本实验检测到了Mouse Liver Total RNA 1 pg～100 ng相当量的cDNA。分析融解曲线可知， 无论哪一种浓度的模板都能够得到单一的PCR扩增产物。同时标准曲线的线性关系良好，在实验浓度范围内能够进行准确定量。