 | ||||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
服务特长 | | |||||||||||||||||
● 提供TaKaRa「Perfect Real Time」系列产品最适合的Primer Set 为了使Real Time RT-PCR实验顺利进行，本公司对NCBI Data Base上登录的Human、Mouse、Rat的RefSeq的绝大部分mRNA序列（Human 20,000种，Mouse 16,000种，Rat 4,600种)，提供最佳的引物设计及合成服务。 ● 省略研究者烦琐的引物设计操作 引物设计使用本公司独有的引物设计技巧和最新的RefSeq Data Base，同时运用各种生物信息网罗分析而选取的最佳引物。 ● 省略反应条件优化操作 使用提供的引物，利用本公司的Real Time PCR试剂和推荐的标准反应条件，可以得到最佳的实验结果，无需进行Mg2+浓度和退火温度等反应条件优化实验。图1显示了使用TaKaRa设计的Primer Set（Human GAPDH）的反应例。 | | |||||||||||||||||
(免费提供引物、探针的设计服务，只收取引物、探针相应的合成费用) | | |||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
图1 反应例 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
以cDNA的梯度稀释液（相当于从Human A431细胞株提取的总RNA 1 pg～10 ng）为模板，Negative Control使用灭菌蒸馏水。使用TaKaRa设计的最佳Primer Set，通过Real Time RT-PCR良好地检测了Human GAPDH基因。图1中：上图显示的是扩增曲线，下图显示的是融解曲线。 本服务的引物设计条件*1具有如下特长： ● 最适合TaKaRa「Perfect Real Time」系列产品使用。 ● 不易形成引物二聚体。 ● 通常引物设计在exon junction上，使genomic DNA的扩增难以进行*2。 ● 引物序列内不含有已知的SNP位点 (已在dbSNP上登录)*3。 ● 通过同源性检索确认了其特异性。 ● 可根据实验目的，自主选择设计的区域。 通常一个目的基因提供1～3对引物*4: ①根据目的基因的全序列设计。 ②在5'端开始的1,500 Base内设计。 ③在3'端开始的1,500 Base内设计（用Oligo dT Primer进行反转录时使用)。 *1 以下设计条件尽量同时满足，不能同时满足时，本公司将按各种条件的优先顺序进行选择。 *2 如果所研究的目的基因上没有exon junction，或者即使有exon junction，在exon junction上设计的引物不适合模板扩增， 此时引物也不在exon junction上设计。 *3 dbSNP是NCBI提供的单碱基置换突变、短序列插入突变、短序列缺失突变的Data Base（http：//www.ncbi.nlm.gov/SNP/)。 *4 有时以目的基因全序列设计的引物，恰好与以5'端序列或3'端序列设计的引物重叠，此时只能提供2对引物。有时目的基 因全序列短，5'端序列和3'端序列不能严格区分，此时只能以全序列为对象提供1对引物。 | | |||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
服务内容 | | |||||||||||||||||
(1) 制品内容 【Primer（合成DNA)】 ● 2支（Forward Primer，Reverse Primer） ● 形态：真空干燥品 ● 合成量：保证2 OD以上 ● 精制级别：PAGE级或高纯度级 【提供信息】 ● 引物序列 ● GC含量 ● Tm值 ● Target在目的基因上的位置及扩增片段大小 ● 引物在基因组上的位置等。 (2) 基因数 对NCBI Data Base上登录的Human、Mouse、Rat的RefSeq的绝大部分mRNA序列，SYBR Green I 嵌合荧光法检测用引物已设计完成的基因数： Human 约20,000个 (96%) Mouse 约16,000个 (95%) Rat 约4,600个 (94%) (3) 服务要求 请认真填写Real Time PCR用引物设计合成服务委托单，委托单请在本商品目录F-39页上拷贝或在网上(http://www.takara.com.cn）下载获得。 委托单上需要提供的相关信息主要有： ①生物种（Human、Mouse、Rat)。 ②目的基因信息（GenBank Acc、Gene ID、关键词)。 ③引物设计的区域范围（全序列、5'端序列、3'端序列)。 将上述信息发送至本公司的服务窗口。 (4) 价格·交货期 | | |||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
其他引物设计合成 服务 | | |||||||||||||||||
本公司同时承接Human、Mouse、Rat以外的生物种以及对RefSeq之外的基因信息或客户独自拥有的序列进行引物设计合成服务。另外，还承接对采用TaqMan探针和Cycling探针法进行Real Time PCR所使用的引物、探针的设计合成等多种服务。 TaKaRa公司生产的双标记探针有很多种，常用的探针见下表。 | | |||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||
此外，我们还可根据客户的特殊需要，生产特殊种类的双标记探针。详情请来电垂询。 | | |||||||||||||||||
 | | |||||||||||||||||
| | | | | | | | | | | | | | | | | | |