![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
TaKaRa AIV RNA Detection Kit | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
D313 | 20 次 | 1,500 元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
制品说明 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
本试剂盒是用于检测禽流感病毒的RNA PCR试剂盒。试剂盒采用了RT-PCR法,定性检测禽流感病毒基因。试剂盒中使用了Reverse Transcriptase M-MLV反转录体系,没有RNase H 污染,增强了反转录性能;试剂盒中的TaKaRa Ex Taq HS可以很好地抑制非特异性扩增。 本试剂盒中还提供了7对禽流感病毒基因的特异性引物,其序列均参考WHO及国家农业行业标准,具有一定的权威性、可靠性。其中,NP、M基因保守性高,可根据其判定是否为甲型(A型)流感病毒;Hx、Nx基因变异较快,可根据其进一步判定其亚型。试剂盒内附带的Control RNA,可以进行正对照反应,用以防止假阴性的出现。 使用本试剂盒扩增得到的PCR产物可以直接使用Sequence Primer进行测序分析,以增加检测结果的准确性。本试剂盒可以检测到少至103 Copies的禽流感病毒RNA,检测性能良好,准确率高,具有广泛的应用价值。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
保存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Control RNA: -80℃保存。 其他组份: -20℃保存。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Protocol | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
【预变性反应】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
使用Control RNA时的实验操作 | 按下表配制反应液,然后于PCR仪上70℃反应5分钟后冰中冷却。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
* Negative Control反应时用RNase Free dH2O替代Control RNA。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
【反转录反应】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
1. 按下组份配制RT反应液。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2. 反应条件。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
【PCR反应】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
1. 按下组份配制PCR反应液 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
2. 反应条件。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
【进行3%的琼脂糖凝胶电泳分析实验结果】 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
说明:RT-PCR结果可能在100 bp左右的位置出现非特异性条带,在判断检测结果时请注意。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
问答 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
使用本试剂盒可以检测少至103 Copies的病毒RNA,但为了确保实验的准确性,我们建议使用105 Copies以上的病毒RNA。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
NP、M、Hx、Nx分别代表禽流感病毒核糖核蛋白、内膜蛋白(基质蛋白)、血凝素、神经氨酸酶的基因。其中,NP、M基因结构保守性高,在扩增时若为阳性则可确定为甲型(A型)流感病毒;Hx、Nx基因变异较快,在扩增时若为阳性则可确定其各种亚型。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||