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pUC118 & 119 Vectors | |||||||||||||||||||||||
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链长 | |||||||||||||||||||||||
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3,162 bp | |||||||||||||||||||||||
制品说明 | |||||||||||||||||||||||
pUC118、pUC119载体适合于DNA片段的克隆、进行DNA测序、对外源基因进行表达等。 由于在IacZ 领域中含有多克隆位点,因此在以IacZ 缺欠细胞作为宿主(如:JM109等)进行转化后,在含有IPTG, X-Gal的平板培养基上进行培养时,可以很容易地通过蓝白筛选,判断载体中有无DNA片段的插入。同时还可以通过载体上的Iac promoter表达外源基因,对插入载体中的DNA片段进行测序等。进行DNA测序时,可以方便地使用M13系列的通用引物。 由于pUC118、pUC119载体中插入了M13 phage DNA的Intergenic region (IG),因此pUC118、pUC119载体还可以在helper phage M13K07的感染之下成为单链DNA,包入phage颗粒内后从菌体内放出。 pUC118 BAP处理载体是非常有用的克隆载体,是由pUC118 DNA经一种在其多克隆位点上仅有一个酶切位点的限制酶酶切后,再用E.coli来源的碱性磷酸酶 (BAP) 处理得到的。 这样处理过的载体可防止自身连接,降低含有空载体的转化细胞数量。因此,pUC118 BAP处理载体使用前不再需要任何处理,可直接用于克隆。 | |||||||||||||||||||||||
pUC118、pUC119的纯度 | |||||||||||||||||||||||
含有70%以上的双链Covalently closed circular form I (RF I)。 用双脱氧测序法确认多克隆位点。 确认EcoR I, Sac I, Kpn I, Sma I, BamH I, Xba I, Sal I, Pst I, Sph I, Hind III 只有一个 酶切位点。 感染Helper phage M13K07,确认单链DNA从菌体内放出。 | |||||||||||||||||||||||
用途 | |||||||||||||||||||||||
克隆外源基因。 利用Iac promoter进行基因表达。 使用M13 primers进行DNA测序。 | |||||||||||||||||||||||
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