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核酸共沉剂 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
D605A | 50 次 | 200 元 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
制品说明 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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本制品是一种乙醇沉淀的共沉剂,对于低浓度核酸(DNA/RNA)的乙醇沉淀特别有效。使用本制品进行乙醇沉淀时,不需要将DNA溶液置于低温,便可直接离心,得到可见的白色沉淀物。即使是低浓度(5 ng/ml)的DNA溶液,或者是短片段的单链、双链DNA,都可以有效进行DNA回收。我们曾经有效回收过20 Bases的单链DNA片段。 本制品不含核酸分解酶。利用本制品回收的DNA可以用于限制酶反应、聚合酶反应以及其他各种分子生物学实验。此外,本制品不影响回收核酸样品的吸光度测定。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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Protocol | 操作方法 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
1. 制备一定浓度的DNA溶液。 2. 加入1/10体积的3 M CH3COONa(pH5.2)溶液,均匀混合。 3. 加入4 ml的DNAmate溶液,均匀混合。 4. 加入2.5倍体积的-20℃预冷无水乙醇,充分混匀。 5. 12,000 rpm 4℃离心15分钟。 6. 弃溶液,留白色沉淀。 7. 沉淀用-20℃预冷的70%乙醇清洗后,真空干燥。 8. 用适量的水或TE Buffer溶解沉淀。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Note | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
DNA浓度极低(小于10 ng/ml)时,回收率会有所下降。 不需要把DNA溶液低温放置,混匀后即可直接离心回收。 DNA溶液的体积小于400 ml时,DNAmate的添加量皆为4 ml;DNA溶液的体积大于 400 ml时,可按每100 ml的DNA溶液添加1 ml DNAmate的比例增加DNAmate的使用量。 本制品既可用于DNA样品,也可用于RNA样品。 要严格按照操作方法的先后顺序加样,必须先加入DNAmate并充分混匀后再加乙醇。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
使用注意 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Application | 取浓度为25 ng/ml的DNA(1 kbp)溶液400 ml(DNA总量10 ng),按照标准操作方法进行乙醇沉淀。用10 ml灭菌水溶解沉淀后,全量进行琼脂糖凝胶电泳。使用SYBR染色观察回收的DNA结果(见图1),同时与未加入DNAmate时回收的样品进行了对照。 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||
实验例 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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图1 回收微量DNA片段时的电泳结果图 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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