近年,随着生物工程技术的蓬勃发展,人工合成Oligo DNA/RNA的需求量越来越大,已经成为分子生物学实验中最基础的试剂之一。而合成Oligo DNA/RNA的质量,将会直接影响科研人员实验计划的顺利进行。因此, 使用高质量的合成Oligo DNA/RNA制品变得尤为重要。

TaKaRa公司已有近二十年合成Oligo DNA/RNA制品的经验,为国际国内客户提供了大量的高质量DNA/RNA合成制品,赢得了良好的国际声誉。

TaKaRa合成Oligo DNA/RNA制品有如下特点。

高质量合成。使用进口试剂,合成高质量的DNA制品。

高纯度纯化。推出OPC纯化、PAGE纯化、HPLC纯化三种级别制品,客户可根据实验需要进行选择。我们保证对每个制品都进行严格的质量管理。

高速度发货。保证当天的定单当天合成,OPC纯化制品三天内发货。

完善的数据。制品包装中附有制品相关的多种数据,包括:合成的原始数据,AGCT各碱基的分布情况,分子量,OD数,nmol数等,使用方便。

DNA合成的原理

Oligo DNA的人工化学合成始于50年代初期,1980年,全自动的固相DNA合成仪面市后,使得快速、高效合成Oligo DNA成为可能,这极大地推动了生物工程技术的蓬勃发展。现在一般都采用b-乙腈亚磷酰胺化学合成Oligo DNA,合成时从3'5'方向进行,通常3'端的第一个碱基结合在Glass担体(Controlled Pore GlassCPG)上。合成的详细过程见图1,现简要说明如下:

1. Step1:脱掉附加在CPG担体上的第一个碱基5'-OH基团上的保护基(DMTr),准备附加下一个新的碱基;

2. Step2:活化新的碱基单体(Phosphoramidite),准备与第一个碱基进行反应;

3. Step3:第二个碱基与第一个碱基发生偶联反应;

4. Step4:将没有反应的第一个碱基的5'-OH加帽封死(Capping),使其不再进一步参与反应;

5. Step5:将核苷亚磷酸酯氧化成更稳定的核苷磷酸酯(即将三价磷氧化成五价磷)。

6. 重复进行Step1Step5的循环,直至合成完所需的Oligo DNA序列。

7. 合成结束后,将Oligo DNA分子从CPG上切下,再进行进一步的纯化。

1 Oligo DNA合成原理图。N1代表第一个碱基,N2代表第二个碱基,依次类推。

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