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修饰、标记LNA的合成价格 | |||||||||||||||||||||||||||
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注) ① LNA碱基的收费标准为:180 元/Base。 ② 以上收费标准限于序列长度在10 ~ 35mer之间。其余请询价。 | |||||||||||||||||||||||||||
DNA制品的纯化 | |||||||||||||||||||||||||||
从DNA的化学合成原理 (参见O-1) 可知,DNA的化学合成是从3'端开始,经一系列的化学反应,逐个地将碱基连接起来的。其中,偶联反应的效率可达到99%,也就是说,每附加一个新碱基,都会有总量的1%的DNA片段附加不上新的碱基(出现合成失败DNA片段),而这些合成失败的DNA片段全部残留在合成DNA粗制品中。如果使用此粗制品直接进行PCR反应、测序反应时,便会影响实验结果。 | |||||||||||||||||||||||||||
一般,粗制品中的目的DNA序列和失败DNA序列的比例大致如下表。 | |||||||||||||||||||||||||||
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这些值是假设每次偶联反应的效率为99%时计算出的近似值,如果进一步考虑其他因素,那上表中的失败DNA的比例还会进一步增大。因此,对合成DNA粗制品进行纯化是非常重要的。下面介绍一下TaKaRa公司DNA合成制品的级别分类。 | |||||||||||||||||||||||||||
TaKaRa合成DNA制品级别分类 | |||||||||||||||||||||||||||
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Oligo DNA/RNA的 摩尔数计算方法 | |||||||||||||||||||||||||||
1个OD值的Oligo DNA/RNA的重量约为33 mg,而每个碱基的平均分子量一般按330道尔顿进行计算。因此, 合成DNA/RNA的nmol数一般按以下公式粗略地计算。 | |||||||||||||||||||||||||||
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● 如果需要计算合成DNA的精确浓度,请按以下公式进行计算。 | |||||||||||||||||||||||||||
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● 如果需要计算合成RNA的精确浓度,请按以下公式进行计算。 | |||||||||||||||||||||||||||
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注)这里的OD值是指DNA/RNA制品的总OD值。 | |||||||||||||||||||||||||||
双链DNA的制备方法 | |||||||||||||||||||||||||||
1. 用STE Buffer (10 mM Tris pH=8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA) 溶解DNA,浓度:1 ~ 5 OD/100 ml。 2. 将二条链等摩尔混合。 3. 94℃保温5分钟后,徐冷至室温。 4. 供实验使用。 | |||||||||||||||||||||||||||
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