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标记染料的光谱学 性质 | | |||||||||||||||||||||||
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注) ① "-"表示暂不能提供此数据。 ② 表中所列全部染料TaKaRa公司均可提供标记服务。 | | |||||||||||||||||||||||
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问答 | | |||||||||||||||||||||||
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怎样对合成DNA/RNA制品进行定量? | | |||||||||||||||||||||||
由于核酸在260nm附近有强吸收，因此常根据此性质，用紫外分光光度计测定核酸溶液在260nm的吸光度值,据此对核酸进行定量，用OD值来表示。1 OD是指： 置于光路长度为1 cm的比色皿中的DNA/RNA溶液，如果其在260nm处的吸光度值为1，则称1 ml该溶液中溶解的DNA/RNA的量为 1 OD。1个OD值的合成DNA/RNA的质量约为33 mg。 | | |||||||||||||||||||||||
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如何测定并计算OD值? | | |||||||||||||||||||||||
将DNA/RNA溶液进行适当稀释，使吸光度测定值与样品浓度的关系在直线范围内，再根据原溶液的总体积与稀释倍数计算该溶液的总OD值。例如，一个200 ml的DNA/RNA溶液，如果对其进行6倍稀释，测定值为1.0时，则该溶液的总OD值为：0.2 ml×6×1.0 OD/ml=1.2 OD 。 | | |||||||||||||||||||||||
合成的DNA应如何保存? | | |||||||||||||||||||||||
1. 干燥制品很稳定，-20℃下可保存2～3年，甚至更长。 2.干品最好用RNase-free的TE (pH8.0) buffer或其它缓冲液溶解，用水溶解也可，但长时间存放时 水溶液可能会变成酸性，促使DNA降解。通常将DNA配制成100 pmol/ml的储备液，分份保存于 -20℃冰箱（每份反复冻融最多5次)。使用前，将储备液稀释成工作液 (10 pmol/ml或20 pmol/ml)， 剩余部分于-20℃保存。 | | |||||||||||||||||||||||
合成DNA溶液在室温下放置了数天，还可以使用吗? | | |||||||||||||||||||||||
溶液中的Oligo DNA在常温下放置3～4天应该没问题，但最好不要放置一个星期以上。其寿命受溶液中的菌体、核酸酶等的影响。 | | |||||||||||||||||||||||
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